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基因突变sanger金标准测序
单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms, SNP)主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,包括碱基的颠换、转换、插入和缺失。Sanger测序是是SNP检测的“金标准”, 是一种无法替代的最直接、最准确的SNP检测方法。
2023
10-20
菌种鉴定
传统的生化方法对微生物进行准确的分类存在较大困难,随着分子生物学的发展,核酸测序已经应运到微生物菌种分析中,DNA测序方法由于不依赖菌种本身特点,对自然界所有菌种均可鉴定,并且更加快速准确的得出鉴定结果,海创科业提供的微生物鉴定服务包括细菌16srDNA鉴定和真菌ITS鉴定、真菌26srDNA鉴定(D1/D2区),通过PCR扩增技术加以测序,通过得出的序列与GenBank中已知序列进行比对即可,大部分菌种可以鉴定到种,海创科业提供的微生物鉴定服务鉴定技术适用于99%以上微生物,鉴定成功率在98%以上。
Minigene 服务
Minigene技术作为体内剪接实验验证的替代技术,为体内检测无样本,样本难以获得或者由于基因表达量等原因无法检出提供了非常好的选择,通过人为设计的Minigene重组质粒转染目的细胞,经RT-PCR产物测序可以直观有效的验证mRNA的剪接形式。
无义介导的mRNA降解验证实验(NMD)
无论是外显子产生的终止密码子突变还是mRNA异常剪接后产生的终止密码子突变,都有可能会被RNA监测机制识别并降解,mRNA 降解途径是在细胞中调节基因表达的一个重要步骤,翻译 mRNA 监视主要有三种形式: nonsense-mediated decay (NMD), no-go decay (NGD) 和 nonstop decay (NSD),只要是提前产生了PTC都有必要考虑NMD降解。
慢病毒包装
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果,在美国已经开展了临床研究,效果非常理想,因此具有广阔的应用前景。
稳转细胞株构建
将外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上,从而使宿主细胞稳定,持续表达目的基因称为稳定细胞系。稳定细胞系相较于瞬时转染的细胞具有能持续表达目的基因,蛋白/抗体稳定性更好,批次差异性更小等优点。是长期观察,研究细胞功能的理想工具。
基因过表达实验
通过构建过表达质粒转染目的细胞来实现基因表达称为基因过表达,海创科业可以实现从头到尾的过表达实验,从基因合成,密码子优化,质粒构建,细胞转染,western blot,qRT-PCR等一系列实验内容来验证基因的表达量。